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食品安全國家標準-食品微生物學檢驗-霉菌和酵母計數

GB 4789.15-2010 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 霉菌和酵母計數

錄入時間:2010-4-28 9:02:54 來源:國家衛生部

本標準自實施之日起代替 GB/T 4789.15-2003《食品衛生微生物學檢驗 霉菌和酵母計數》 。
本標準與 GB/T 4789.15-2003 相比,主要修改如下:
——修改了范圍;
——修改了檢驗程序和操作步驟;
——修改了培養基和試劑;
——修改了設備和材料;
——修改了附錄。
本標準的附錄 A為規范性附錄,附錄 B 為資料性附錄。
本標準所代替標準的歷次版本發布情況為:
——GB 4789.15-1984、GB 4789.15-1994、GB/T 4789.15-2003。

 

1 范圍
本標準規定了食品中霉菌和酵母菌(moulds and yeasts)的計數方法。
本標準適用于各類食品中霉菌和酵母菌的計數。

2 設備和材料
除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備和材料如下:

2.1 冰箱:2℃~5℃。
2.2 恒溫培養箱: 28℃±1℃。
2.3 均質器。
2.4 恒溫振蕩器。
2.5 顯微鏡:10×~100×。
2.6 電子天平:感量 0.1 g。
2.7 無菌錐形瓶:容量 500 mL、250 mL。
2.8 無菌廣口瓶:500 mL。
2.9 無菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)。
2.10 無菌平皿:直徑 90 mm。
2.11 無菌試管: 10 mm×75 mm。
2.12 無菌牛皮紙袋、塑料袋。

3 培養基和試劑

3.1 馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基:見附錄 A 中 A.1。
3.2 孟加拉紅培養基:見附錄 A 中 A.2。

4 檢驗程序
霉菌和酵母計數的檢驗程序見圖1。
霉菌和酵母計數的檢驗程序

5 操作步驟

5.1 樣品的稀釋
5.1.1 固體和半固體樣品:稱取 25 g 樣品至盛有 225 mL 滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為 1:10 稀釋液。或放入盛有 225 mL 無菌蒸餾水的均質袋中,用拍擊式均質器拍打 2min,制成 1:10 的樣品勻液。
5.1.2 液體樣品:以無菌吸管吸取 25 mL 樣品至盛有 225 mL 無菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成 1:10 的樣品勻液。
5.1.3 取 1 mL 1:10 稀釋液注入含有 9 mL 無菌水的試管中, 另換一支 1 mL 無菌吸管反復吹吸,此液為 1:100 稀釋液。
5.1.4 按 5.1.3 操作程序,制備 10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用 1 次 1 mL 無菌吸管。
5.1.5 根據對樣品污染狀況的估計,選擇 2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液), 在進行 10 倍遞增稀釋的同時,每個稀釋度分別吸取 1 mL 樣品勻液于 2 個無菌平皿內。同時分別取 1 mL 樣品稀釋液加入 2 個無菌平皿作空白對照。
5.1.6 及時將 15 mL~20 mL 冷卻至 46℃的馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂或孟加拉紅培養基(可放置于
46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉動平皿使其混合均勻。

5.2 培養
待瓊脂凝固后,將平板倒置,28℃±1℃培養 5d,觀察并記錄。
5.3 菌落計數
肉眼觀察,必要時可用放大鏡,記錄各稀釋倍數和相應的霉菌和酵母數。以菌落形成單位(colony
forming units,CFU)表示。
選取菌落數在 10 CFU~150 CFU 的平板,根據菌落形態分別計數霉菌和酵母數。霉菌蔓延生長覆蓋整個平板的可記錄為多不可計。菌落數應采用兩個平板的平均數。

6 結果與報告

6.1 計算兩個平板菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數計算。
6.1.2 若所有平板上菌落數均大于 150 CFU,則對稀釋度最高的平板進行計數,其他平板可記錄為多 不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。
6.1.3 若所有平板上菌落數均小于 10 CFU,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。
6.1.4 若所有稀釋度平板均無菌落生長,則以小于 1 乘以最低稀釋倍數計算;如為原液,則以小于 1 計數。
6.2 報告
6.2.1 菌落數在 100 以內時,按"四舍五入"原則修約,采用兩位有效數字報告。
6.2.2 菌落數大于或等于 100 時,前 3 位數字采用"四舍五入"原則修約后,取前 2 位數字,后面用 0 代替位數來表示結果;也可用 10 的指數形式來表示,此時也按"四舍五入"原則修約,采用兩位有效數字。
6.2.3 稱重取樣以 CFU/g 為單位報告,體積取樣以 CFU/mL 為單位報告,報告或分別報告霉菌和/或酵母數。

食品微生物學檢驗2010標準
食品微生物學檢驗2010標準(GB 4789)已于2010年3月正式頒布并于2010-06-01開始實施.
詳細請看:
GB 4789-2010檢驗標準
GB 4789-2010培養基目錄
食品微生物學檢驗2010標準
GB 4789.1-2010 總則
GB 4789.2-2010 菌落總數測定
GB 4789.3-2010 大腸菌群計數
GB 4789.4-2010 沙門氏菌檢驗
GB 4789.10-2010 金黃色葡萄球菌檢驗
GB 4789.15-2010 霉菌和酵母計數
GB 4789.18-2010 乳與乳制品檢驗
GB 4789.30-2010 單核細胞增生李斯特氏菌檢驗
GB 4789.35-2010 乳酸菌檢驗
GB 4789.40-2010 阪崎腸桿菌檢驗
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